常见微生物培养基配方及制作方法

发布于 2025-03-05 16:45:07

1


LB培养基（Luria-Bertani Medium）


    · 用途：
通用培养基，适合革兰氏阳性和阴性菌（如E. coli）生长，用于分子生物学实验和普通菌株培养。

· 配方（1L）：

o 蛋白胨：10g

o 酵母提取物：5g

o 氯化钠：10g

o 琼脂（固体培养基）：15g

o 蒸馏水：1000mL

· 制作方法：

a)将蛋白胨、酵母提取物和氯化钠溶解于蒸馏水中，加入琼脂（固体培养基）。

b)加热搅拌至完全溶解，蒸馏水定容至1000mL。

c) 高压灭菌（121°C，15分钟）。



2

营养琼脂培养基（Nutrient Agar）


    · 用途：

非选择性培养基，常用于培养非特殊营养需求的细菌，适合多数细菌（如大肠杆菌）的分离和培养。

· 配方（1L）：

o 牛肉浸粉：3g

o 蛋白胨：5g

o 氯化钠：5g

o 琼脂：15g

o 蒸馏水：1000mL

     · 制作方法：

a) 将蛋白胨、牛肉浸粉和氯化钠溶解于蒸馏水中，加入琼脂（固体培养基）。

b) 加热搅拌至完全溶解，蒸馏水定容至1000mL。

c) 高压灭菌（121°C，15分钟）倒平板。

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3


营养肉汤培养基（Nutrient Broth）


    · 用途：

液体培养基，常用于细菌液体培养或细菌代谢研究。适用于保存菌种或计数，但不适合营养要求高的细菌。

· 配方（1L）：

o 牛肉浸粉：3g

o 蛋白胨：5g

o 氯化钠：5g

o 蒸馏水：1000mL

    · 制作方法：

将成分溶解于水中，搅拌均匀。蒸馏水定容至1000mL后分装，121°C高压灭菌15分钟。



4


血平板培养基（Blood Agar）


    · 用途：

用于培养大多数病原菌（如溶血性链球菌），可观察溶血现象（α溶血、β溶血或γ溶血）

· 配方（1L）：

o营养琼脂基础：40g

o新鲜羊血：50mL

o蒸馏水：950mL

    · 制作方法：

a) 按营养琼脂配方制备基础培养基，高压灭菌（121°C，15min）后冷却至50°C。

b) 加入无菌的新鲜羊血，混匀后倒平板。


 

5


麦康凯培养基（MacConkey Agar, MAC）


    · 用途：

选择性鉴别培养基，选择性鉴别革兰氏阴性菌（如大肠杆菌），抑制革兰氏阳性菌生长，乳糖发酵菌呈粉红色菌落（中性红指标）。

· 配方（1L）：

o蛋白胨：17g

o胰酪胨：3g

o乳糖：10g

o胆盐：1.5g

o中性红：0.03g

o氯化钠：5g

o琼脂：13.5g

o蒸馏水：1000mL

o结晶紫：0.001g

    · 制作方法：

将所有成分加入水中，加热搅拌至完全溶解。蒸馏水定容至1000mL。高压灭菌（121°C，15min），冷却后倒平板。

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6


硫化氢培养基（Triple Sugar Iron Agar）


    · 用途：

用于检测细菌的糖发酵能力及硫化氢产生，常用于肠道细菌的鉴定。

· 配方（1L）：

o葡萄糖：1g

o乳糖：10g

o蔗糖：10g

o牛肉浸粉：3g

o蛋白胨：20g

o硫代硫酸钠：0.3g

o氯化钠：5g

o亚铁盐：0.2g

o酚红：0.024g

o琼脂：15g

o蒸馏水：1000mL

    · 制作方法：

a)所有成分加水溶解后，分装于试管，倾斜凝固成斜面和深层。

b)高压灭菌（121°C，15分钟）。


 

7


SS培养基（Salmonella-Shigella Agar）


    · 用途：

选择性培养基，用于分离沙门氏菌和志贺氏菌，乳糖发酵菌显红色，沙门氏菌产生黑色菌落。

· 配方（1L）：

o蛋白胨：5g

o乳糖：10g

o胆盐：8.5g

o硫代硫酸钠：8.5g

o氯化铁：1g

o琼脂：15g

o中性红：0.025g

o蒸馏水：1000mL

    · 制作方法：

按以上配方制作，所有成分搅拌至溶解后加入琼脂加热至完全溶解定容至1L，高压（121°C，15min）灭菌。倒平板后冷却备用。


 

8


胰酪酵母培养基（Tryptic Soy Agar, TSA）


    · 用途：

通用培养基，适合多种细菌的培养，广泛用于微生物检测和存储菌株。

· 配方（1L）：

o胰酪胨：15g

o酵母提取物：5g

o氯化钠：5g

o琼脂：15g

o蒸馏水：1000mL

    · 制作方法：

将所有成分溶解于水中加入琼脂完全溶解，定容至1000mL，高压灭菌（121°C，15min）后倒平板。


 

9


MRS培养基（De Man, Rogosa and Sharpe Agar, MRS）


    · 用途：

专用于乳酸菌的培养，低pH抑制其他细菌生长。

· 配方（1L）：

o葡萄糖：20g

o蛋白胨：10g

o酵母提取物：4g

o牛肉提取物：10g

o柠檬酸三铵：2g

o磷酸氢二钾：2g

o硫酸镁：0.2g

o硫酸锰：0.05g

o琼脂：15-20g

o蒸馏水：1000mL

    · 制作方法：

所有成分溶解后高压灭菌（121°C，15min），冷却后倒平板。

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10


纤维素分解培养基（Cellulose Decomposition Medium）


    · 用途：

用于筛选纤维素分解菌，纤维素酶活性研究。

· 配方（1L）：

o微晶纤维素：10g

o硝酸钾：1g

o磷酸氢钾：1g

o硫酸镁：0.5g

o氯化钠：0.5g

o琼脂：15-20g

o蒸馏水：1000mL

    · 制作方法：

所有成分溶解于蒸馏水后高压灭菌（121°C，15min），冷却后倒平板。


 

11


沙氏琼脂培养基（Sabaurauds agar）


    · 用途：

用于医药工业洁净室（区）沉降菌的测试，低pH和抗生素抑制细菌生长。

· 配方（1L）：

o葡萄糖 ：40g

o酪蛋白胰酶消化物、动物组织的胃酶消化物等量混合 ：10g

o琼脂 ：15g

o氯霉素： 0.1g

o蒸馏水 ：1000ml

    · 制作方法：

以上成分（除琼脂）溶解于蒸馏水中，加入琼脂继续加热溶解，高压灭菌121°C，15min），倒平板。


 

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伊红美蓝培养基（Eosin Methylene Blue Agar, EMB）


    · 用途：

鉴别大肠杆菌（金属光泽菌落）与其他肠杆菌。伊红和美蓝抑制革兰氏阳性菌，乳糖发酵菌落呈深紫色或绿色金属光泽。

· 配方（1L）：

o乳糖：10 g

o伊红： 0.4 g

o美蓝：0.065 g

o蛋白胨：10 g

o琼脂：15 g

    · 制作方法：

将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。


 

13


马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar Medium）


    · 用途：

常用的培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真真菌培养及产孢诱导。

· 配方（1L）：

o马铃薯浸粉4 g

o葡萄糖20 g

o琼脂15 g

    · 制作方法：

将所有成分加入水中，加热搅拌至完全溶解。蒸馏水定容至1000mL。高压灭菌（121°C，15min），冷却后倒平板。

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